蔡司LSM 880 with Airyscan激光共聚焦显微镜


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Airyscan技术革新了共聚焦的成像方式

为了取得研究进展,您可能希望获得微小的结构图像,捕捉到微弱的信号或追踪高效的进程—甚至希望上面的要求全部实现。

如果您需要从活细胞或其他弱标记样本中获取精准数据,那么没有什么其他的设备能提供如此高的灵敏度、分辨率或速度了。每份发出的荧光光子都是宝贵的。

Airyscan技术能够使您拥有快速超高分辨率且高灵敏的共聚焦图像采集手段。采用多色荧光标记的样品所得的图像质量是高度准确。与传统GaAsP共聚焦探测器的成像情况相比,这种新型探测器设计优良,并能将信噪比(SNR)提升4-8倍。此外,能够在您进行单光或多光子实验时,将分辨率提高1.7倍。

特点

Airyscan带您进入一个共聚焦的新世界

  • 高灵敏度,提升的x,y和z方向的分辨率,以及高速等性能的集于一个共聚焦系统中。
  • 提升您的图像分辨率:Airyscan可以帮您达到横向140nm,轴向400nm(488nm激发)的分辨率。
  • 通过Airyscan快速模式带来的高速采集、高灵敏度和超高分辨率,可以满足科研中遇到的各种需要。

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果蝇胚胎,中枢神经系统的最大强度投影(颜色-深度编码)。

由德国波恩LIMES研究所的J. Sellin和AG Hoch提供。

执行定量成像

  • 通过线性扫描进行均匀照明,并结合高灵敏度检测装置对样品进行低损伤地成像。
  • 得益于完全相同的像素时间和持续的扫描监测,您可以在任意速度和扫描模式下执行荧光定量分析。
  • 即使是从严格的单分子成像和分析中,您也能够得到稳定而可靠的结果。

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与GFP融合的异染色质蛋白质1(HP-1),在人类Hep G2 细胞的细胞核表达。

提高效率

  • 在需要标记多个荧光标签的蛋白质定位和相互作用的研究中节省了时间,因为所有信号可以一次收集完成。
  • 使用更大数量的内置检测通道或外置检测通道,在单次扫描中执行同步光谱探测,包括GaAsP检测器技术。
  • 充分利用大视场和共聚焦线性扫描式的高速度——目前最高可至13fps (512x512)。

Airyscan 原理

Airyscan是一种能够获取到信号的探测器,它的工作原理是一个点光源经过荧光显微镜后会成像为一个被称为“艾里斑”的扩大的光斑。在一台标准的共聚焦显微镜中,焦平面以外的发射光会被针孔挡住,针孔的尺寸决定了有多少艾里斑能够进入探测器内。针孔缩的越小,得到的图像越锐利,且图像越暗淡,因为大部分光都丢失了。光圈针孔越小分辨率越高,但是——同样——失去的光信号也就越多。

Airyscan通过将艾里斑置于同心排列的六角形探测器列阵中成像,解决了分辨率和光效率之间的难题。其探测区域由32个独立的探测元件组成,所有元件都具有针孔一样的功能。共聚焦本身的针孔保持开放状态,不阻挡任何光进入——因此整个艾里斑的所有光子都能够被收集到。 



所有探测元件的信号都会被再分配到指定的正确位置,然后通过提升的信噪比和分辨率生成图像。
由于一个区域探测器由多个探测元件构成,因而在进入成像模式时具有非常大的灵活性。在快速模式中,激发光束按y方向延长,并且Airyscan探测器能够获取到4条图像信息线,而非仅通过水平扫描获得1条。这种平行化的方式将高速度、高分辨率和高灵敏度结合在一起。Airyscan能够充分利用共聚焦的扫描和光学切面能力,因此它完全适用于您的标准样品、标准染料甚至较厚的样品,如组织切片或整个动物,这些样品往往对穿透深度有更高的要求。

在单光子或多光子实验中获得更高的信噪比,超分辨率或速度,取决于您是否充分利用了Airyscan和快速??榈挠攀?。

快速扫描和线性扫描

强大的结合

要解决在动态细胞和亚细胞中标记蛋白的运动问题,您往往需要以每秒10帧左右的速度成像。现在通过LSM880,您能够以高达每秒13帧的速度拍摄512×512像素的图像。

而运用带有快速??榈腁iryscan技术以后,则能够以高达每秒27帧的速度拍摄480 ×480像素的图像。LSM880不断检测和校正扫描镜位置,以保证能够提供稳定视场,以及整个视场都具有完全相同的像素时间。线性扫描是进行定量和关联成像的必要前提。它能够在照明激光扫描整个区域(包括兴趣操作区)时提供恒定的信噪比和均匀曝光。不同于传统的正弦扫描共聚焦,LSM880将超过80%的扫描时间都用于数据采集上。这意味着在同一采集速度下,由于更长的像素时间,您能够得到29%的信噪比提升。

光谱

多通道平行采集

它采用多个标记物分析不同细胞或亚细胞结构之间的相互关系,您可通过同时记录强度使时间精度达到较高并加快成像时间。LSM880可以获得整个光谱——包括所有标记物——一次扫描32个通道,以每秒5帧的速度摄取512 x512像素的图像。

设置10个通道进行光谱成像,并增加一个透射光通道。现在仅需扫描一次即可拍摄出所有的荧光染料和额外的明场。这样既?;ち搜酚纸谑×耸奔?。
尤其对于要求较高的多光子实验而言,您将从这种基本性能中受益匪浅:多达12个外置检测器能够并行读出探测结果。

LSM 880 with Airyscan中Airyscan的光路

 

 

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