赛默飞QuantStudio 3D 数字PCR


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QuantStudio® 3D 数字 PCR 系统 使用密封芯片技术,提供可靠方法和高精度、高灵敏度数据,实现绝对定量。
数字 PCR 是一种核酸检测和定量分析的新方法,可以作为传统实时定量 PCR 的替代方法,以实现绝对定量及稀有等位基因的检测。 数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信号累积。 PCR 分析后,阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的绝对计数,而无需标准品或内标。

纳流芯片的使用提供了便捷和直观的机制来同时平行运行上千个 PCR 反应。 每个孔都加入了样品、扩增混合物和 TaqMan® 测定试剂的混合物,然后进行单独分析以检测存在(阳性)或不存在(阴性)终点信号。 考虑到孔可能接收到多个靶标序列分子,使用泊松模型应用了一个校正因子。

数字 PCR
数字 PCR 的优点
  • 无需依赖参考物或标准品
  • 通过使用更多 PCR 复制物能够提高精确度
  • 对抑制剂具有较高耐受性
  • 能够分析复杂混合物
  • 对较小倍数改变的线性检测

 

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